Главная Биохимический анализ крови Методы исследования (для профессионалов медицины) Унифицированный метод определения электролитов в эритроцитах
Биохимический анализ крови - Методы исследования (для профессионалов медицины)

эритроцитПринцип метода определения электролитов в эритроцитах

Эритроциты отделяют центрифугированием, гемолизируют водой и определяют содержание электролитов методом фотомет­рии пламени.

В связи с тем, что между эритроцитами всегда остается некоторое количество плазмы, большое значение имеет единообразие режимов центрифугирования; приведенный ниже режим рекомендован в качестве унифицированного. 

Приготовление калибровочных растворов для определения электролитов в эритроцитах

В качестве исходных используют те же растворы, что и при определении натрия и калия в плазме.

1.  Рабочий калибровочный раствор для определения калия в эритроцитах.

В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят 3,84 мл исход­ного калибровочного раствора КС1, содержащего 100 ммоль/литр, и доводят объем водой до 100 мл; получается основной калибро­вочный раствор с концентрацией 3,84 ммоль/литр. Из него готовят разведения согласно таблице.

2.  Рабочий калибровочный раствор для определения натрия в эритроцитах.

Определение электролитов в эритроцитах

Раствор КС1 3,84 ммоль/л, мл

Вода, мл

Концентрация калия, ммоль/л

Соответствует содержанию калия в эритроцитах при разведении 1 : 260, ммоль/л

7,5

до 100

0,288

75

8,0

до 100

0,308

80

8,5

до 100

0,327

85

9,0

до 100

0,346

90

9,5

до 100

0,365

95

В мерную колбу вместимостью 1 литр вносят 33 мл исходного ка­либровочного раствора КС1, содержащего 100 ммоль/литр, и доводят до 1 л; получается фоновый раствор, содержащий 3,3 ммоль/литр КСl. В колбу вместимостью 100 мл вносят 1 мл исходного калибровоч­ного раствора NaCl, содержащего 1000 ммоль/литр, и доводят до объема 100 мл фоновым раствором, содержащим 3,3 ммоль/литр КСl; получается раствор, содержащий 10 ммоль/литр NaCl и 3,3 ммоль/литр КСl. Из полученных растворов готовят разведение согласно таблице.

Определение натрия в эритроцитах

Раствор, содержащий 10 ммоль/л NaCl и 3,3 ммоль/л КО, мл

Фоновый раствор 3,3 ммоль/л КС1, мл

Концентрация, ммоль/л

Соответствует содержанию натрия в эритроцитах при разведении 1 : 26, ммоль/л

К

Na

5

до 100

3,3

0,5

13,0

6

до 100

3,3

0,6

15,6

7

до 100

3,3

0,7

18,2

8

до 100

3,3

0,8

20,8


Ход определения электролитов в эритроцитах

Кровь для исследования берут с гепарином из расчета 5 мг (650 ЕД) на 1 мл, центрифугируют в течение 15 минут при скоро­сти 3000 об./мин, отсасывают плазму с верхним слоем эритроци­тов и снова центрифугируют в течение 30 минут при скорости 3000 об./мин и удаляют верхний слой.

Из упакованного слоя эритроцитов берут пробу, которую раз­водят водой для определения калия в 260 раз, а для определения натрия — в 26 раз. Пробы сжигают одновременно с калибровоч­ными растворами. Расчет проводят по калибровочному графику.

 

Добавить комментарий

Защитный код
Обновить